尊龙凯时致力于为科研人员提供高质量的细胞培养材料,特别是常用的SH-SY5Y细胞系,广泛应用于神经生物学的各类研究,包括神经分化、神经退行性疾病模型以及药物毒性测试等。
一、SH-SY5Y细胞培养注意事项
1. 培养基与条件
基础培养基:常用的选择为DMEM或RPMI-1640,并需补充10-15%的胎牛血清(FBS)和1%双抗。
培养条件:将细胞培养在37℃、5% CO₂、湿度饱和的环境中,以维持细胞的正常生长。
换液频率:每2-3天更换培养基,以避免细胞对营养的过度消耗。
2. 细胞传代
消化时间:使用0.25%胰酶(含EDTA)消化1-3分钟,避免过度消化对细胞造成伤害。
传代比例:通常推荐传代比例为1:3至1:6,根据细胞的密度调整;在细胞融合度达到80-90%时进行传代。
轻柔操作:SH-SY5Y细胞与培养皿的粘附较为松散,吹打时需动作轻柔,以防止机械性损伤。
3. 细胞状态监测
形态观察:健康的SH-SY5Y细胞呈现梭形或三角形,并通常聚集成簇生长;若细胞变圆、脱落或碎片增多,可能表示细胞状态不佳或受到污染。
污染防控:严格遵循无菌操作规程,定期进行支原体检测,以确保细胞的纯度。
4. 冻存与复苏
冻存液:使用无血清细胞冻存液,货号为WXQA100。
复苏步骤:将细胞快速解冻后离心,去除DMSO,并进行高密度接种,以提高存活率。
三、常见问题与解决方案
细胞贴壁性差:可增加培养基中血清的比例(如15% FBS),或在培养皿表面使用多聚赖氨酸进行包被。
容易自发分化:避免细胞过度融合(达90%),及时进行传代,以保持细胞的稳定性。
尊龙凯时在此过程中提供了百余种细胞种子,主要来源于ATCC、DSMZ、JCRB、中科院及国家干细胞资源库等机构。所有人源细胞系均提供STR鉴定报告,鼠源细胞系则提供种属鉴定,并能够进行位点比对,确保准确的STR鉴定结果。同时,所有细胞均经过批量冻存,实施严格的代次管控,并通过无菌和无支原体检测,确保细胞质量可靠。